分離純化的目的是去除粗提物中的其他雜質(zhì)，獲得一定純度的目標產(chǎn)物。

小試純化工藝放大至生產(chǎn)規(guī)模時，耀海生物團隊會判斷工藝穩(wěn)定性或設(shè)備差異對工藝過程及產(chǎn)物的影響。我們建議在小試與GMP生產(chǎn)的轉(zhuǎn)移過程中，增加中試放大的環(huán)節(jié)，以驗證純化工藝的穩(wěn)定性和可行性，并對工藝參數(shù)加以調(diào)整使其高度契合生產(chǎn)規(guī)模。

層析是質(zhì)粒DNA捕獲、中度純化和精度純化的重要工藝之一。耀海生物可提供中試規(guī)模的質(zhì)粒DNA層析純化服務(wù)，滿足質(zhì)粒經(jīng)典三步法層析：凝膠過濾層析（分子篩, SEC）、嗜硫親和層析（AC）、陰離子交換層析（IEX），以及其他定制化層析工藝的中試放大需求，目的是高效捕獲超螺旋質(zhì)粒，去除HCP、HCD與內(nèi)毒素等殘留物質(zhì)。

耀海生物具有十余年微生物體系質(zhì)粒DNA和重組蛋白生產(chǎn)及服務(wù)經(jīng)驗，我們能夠快速識別并控制關(guān)鍵參數(shù)，成功實現(xiàn)層析等純化工藝的放大。

服務(wù)詳情

純化工藝放大前后的差異

純化工藝放大經(jīng)驗分享

純化放大生產(chǎn)時，第一步的過濾澄清必不可少。澄清的目的是進一步去除顆粒物質(zhì)、避免對下游純化的不利影響，通常使用中空纖維或膜包完成，工藝轉(zhuǎn)移或放大過程中的關(guān)鍵參數(shù)包括處理批量、膜面積和流速。

層析純化，即采用不同的層析填料，將不同大小、電荷、極性和特異性的雜質(zhì)去除，得到高純度目的產(chǎn)物的過程。

經(jīng)典的質(zhì)粒純化三步法層析為：

第一步通過分子篩/凝膠過濾層析（SEC）去除RNA；

第二步親和層析（AC）捕獲超螺旋質(zhì)粒；

最后一步陰離子交換層析（ICX）去除內(nèi)毒素。

層析工藝轉(zhuǎn)移中的關(guān)鍵參數(shù)包括：處理批量、柱體積、上樣體積和流速。

耀海生物生產(chǎn)團隊基于豐富的質(zhì)粒生產(chǎn)服務(wù)經(jīng)驗，總結(jié)了純化工藝轉(zhuǎn)移和放大過程中的常見問題和放大策略：